935 resultados para Staphylococcus aureus - Teses
Resumo:
A infeco pulmonar de etiologia bacteriana um dos principais problemas que levam a morbi-mortalidade na fibrose cstica (FC). Staphylococcus aureus se destaca como um dos micro-organismos mais frequentes e com um agravante para a teraputica quando se apresentam resistentes oxacilina (MRSA). Amostras MRSA podem ser classificadas tanto genotipicamente quanto fenotipicamente em MRSA adquiridas na comunidade (CA-MRSA) ou adquiridas no hospital (HA-MRSA). Fenotipicamente, essa classificao muito controversa, podendo se basear em critrios epidemiolgicos ou ainda pelo perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos. Por outro lado, a classificao genotpica consiste na determinao dos cassetes cromossmicos (SCCmec), local de insero do gene mecA (que confere resistncia a meticilina). Atualmente so reconhecidos 11 tipos de SCCmec, sendo os de tipo I ao III e VIII relacionados ao gentipo HA-MRSA e IV ao XI ao gentipo CA-MRSA. Classicamente CA-MRSA capaz de produzir a toxina Panton-Valentine leukocidin (PVL), codificada pelos genes luk-S e luk-F que est associada pneumonia necrotizante e infeces de tecidos moles em pacientes com FC com quadros de exacerbao pulmonar. No Brasil, raros so os trabalhos envolvendo caracterizao de SCCmec em amostras de pacientes com FC. Diante disso, este estudo teve como objetivo principal a caracterizao dos tipos de SCCmec e ainda a determinao do perfil de susceptibilidade a antimicrobianos em uma populao de MRSA recuperada de pacientes com FC assistidos em dois centros de tratamento no Rio de Janeiro, Hospital Universitrio Pedro Ernesto (HUPE) e Instituto Fernandes Figueira (IFF). Foram estudadas 108 amostras de MRSA isoladas do perodo de 2008 a 2010, sendo 94 oriundas de 28 pacientes adultos atendidos no IFF e 14 de 2 pacientes adultos atendidos no HUPE. Foram encontradas altas taxas de resistncia para os antimicrobianos oxacilina, cefoxitina e eritromicina. Todas as amostras foram sensveis vancomicina e a linezolida quando determinada as Concentraes Inibitrias Mnimas (CIM). Atravs da tcnica de PCR foi possvel a tipificao dos SCCmec em 82,4% das amostras, sendo 64% destas compatveis ao gentipo CA-MRSA. No houve diferena estatstica nas taxas de susceptibilidade aos antimicrobianos entre as amostras CA-MRSA e HA-MRSA. Foram encontrados os SCCmec dos tipos I, III, IV e V, sendo os tipos I e IV os mais frequentes. O gene que codifica a toxina PVL foi encontrado em 34,2% das amostras e foi observado em amostras CA-MRSA e HA-MRSA. Nosso estudo se destaca por apresentar um alto percentual de amostras CA-MRSA e ainda por ser o primeiro do pas a detectar a presena do gene que codifica a toxina PVL em pacientes com FC. Alm disso, de forma indita na literatura, encontramos o gene luk-S, em amostras classificadas como HA-MRSA em pacientes com FC. Os poucos estudos nacionais, bem como as diferenas encontradas entre trabalhos, refletem a necessidade de conhecimento mais aprimorado do MRSA envolvido nas infeces pulmonares dos pacientes com FC.
Resumo:
Staphylococcus aureus resistente meticilina (MRSA) um importante patgeno pulmonar em pacientes com fibrose cstica (FC). Caracteriza-se pela resistncia a todos os β-lactmicos, devido a presena do elemento gentico mvel SCCmec o qual abriga o gene mecA. Alm disso, reconhecido por vrios fatores de virulncia o qual destacamos a toxina Panton-Valentine Leukocidin (PVL), uma citolisina formadora de poros na clula hospedeira, e por apresentar diversos clones epidmicos envolvidos em surtos hospitalares. O objetivo desse estudo foi caracterizar a epidemiologia de MRSA, isolados de pacientes com FC referente a dois centros de referncia no Rio de Janeiro a partir da aplicao de tcnicas fenotpicas e genotpicas. Um total de 57 amostras de MRSA foi submetido ao teste de difuso em gar para 11 antimicrobianos a fim de avaliar perfil de resistncia, com aplicao da tcnica da PCR foi tipificado o SCCmec e investigado a presena do gene LukS-PV responsvel pela codificao da toxina PVL com intuito de estabelecer uma melhor caracterizao epidemiolgica dos clones identificados pela tcnica do MLST (Multilocus Sequence Typing). Os antimicrobianos no β-lactmicos apresentaram um percentual de resistncia abaixo de 50%, em que destacamos a eritromicina com o maior percentual 45,6% e quanto ao perfil de resistncia 24,6% foram multirresistentes. Com exceo do SCCmec II, os outros tipos foram encontrados (I, III, IV e V) com os respectivos percentuais de 22,8% (n=13), 7,1% (n=4), 61,4% (n=35) e 3,5% (n=2) e apenas 5,3% (n=3) das amostras no foram caracterizadas, no h dados da prevalncia do SCCmec IV. Vinte (35,1%) amostras apresentaram produtos de amplificao compatvel com a presena do gene lukS, aproximadamente metade dessas amostras (55%) estava correlacionada ao SCCmec IV. Com a anlise do MLST, obtivemos os STs 1 (n=1, 1,7%), 5 (n=28, 49,1%), 30 (n=11, 19,3%), 72 (n=1, 1,7%), 398 (n=1, 1,7%), 1635 (n=7, 12,3%), 1661 (n=2, 3,5%), 239 (n=5, 8,8%), e ainda identificamos um novo ST (2732) presente em 1 amostra. A partir de uma anlise associativa entre o MLST e o SCCmec foi possvel observar a presena de linhagens caractersticas de clones epidmicos, como o UK-EMRSA-3 (ST5, SCCmec I), USA 800/peditrico (ST5, SCCmec IV), Oceania Southwest Pacific Clone - OSPC (ST30, SCCmec IV) e Brazilian Epidemic Clone - BEC (ST239, SCCmec III). Em concluso este estudo o primeiro a caracterizar linhagens epidmicas de MRSA nos centros de atendimento a pacientes com FC no Rio de Janeiro, sendo necessrio um monitoramento constante a fim de evitar a disseminao desses clones.
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Ps-graduao em Biocincias e Biotecnologia Aplicadas Farmcia - FCFAR
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A Neuromielite ptica (NMO), anteriormente considerada como um subtipo de Esclerose Mltipla, uma doena autoimune, inflamatria do sistema nervoso central, na qual o sistema imune ataca a mielina dos neurnios localizados nos nervos pticos e medula espinhal, produzindo, ento, mielite e neurite ptica simultnea ou sequenciais. A patognese da neuromielite ptica influenciada pela combinao de fatores genticos e ambientais, incluindo agentes infecciosos. Diferentes doenas infecciosas podem tanto desencadear como exacerbar a autoimunidade. Portanto, o objetivo do presente estudo foi de analisar a responsividade imune in vitro a Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans em pacientes com NMO recorrente-remitente, e a correlacionar ao nvel de incapacidade neurolgica. Nesse contexto, a extenso da linfoproliferao e perfil de citocinas em resposta a S. aureus e C. albicans, em culturas de clulas mononucleares do sangue perifrico (CMSP) foram similares entre pacientes com NMO e indivduos saudveis. Entretanto, maior proliferao de clulas T associada elevada liberao de IL-1β, IL-6 e IL-17 foi observada em culturas de clulas derivadas de pacientes com NMO quando estimuladas com E. coli. Ademais, nessas culturas, a produo de IL-10 foi significativamente menor quando comparada ao grupo controle. Ensaios conduzidos em culturas de CMSP depletadas de diferentes subtipos de linfcitos demonstraram que, enquanto clulas T CD4+ e T CD8+ produzem IL-6 em resposta a E. coli, a produo de IL-17 foi praticamente restrita s clulas T CD4+. Os nveis de IL-6 e IL-17 in vitro induzidos por E. coli foram correlacionados positivamente s incapacidades neurolgicas. Essa maior tendncia a produzir citocinas relacionadas ao perfil Th17 foi diretamente associada aos nveis de IL-23 produzidos por moncitos ativados com LPS. De modo interessante, nveis elevados de LPS foram quantificados no plasma de pacientes com NMO e estes foram correlacionados aos nveis plasmticos de IL-6. Em concluso, nossos resultados sugerem que uma maior responsividade a E. coli poderia estar envolvida na patognese da NMO. Esse tipo de investigao muito importante pois inibidores da ligao ou sinalizao do TLR poderiam ser considerados terapias com grande potencial como adjuvantes no tratamento de pacientes com NMO.
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O Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) foi inicialmente descrito como um patgeno associado a infeces relacionadas assistncia em sade; porm, um clone de MRSA, o CA-MRSA emergiu na comunidade e est atualmente incrementando nos hospitais. O objetivo desta tese foi descrever aspectos relacionados com a epidemiologia das infeces por cepas CA-MRSA no Hospital Universitrio Pedro Ernesto da Universidade do Estado do Rio de Janeiro (HUPE/UERJ), avaliando especificamente fatores de risco relacionado com as infeces por CA-MRSA. Usando informaes das bases de dados do laboratrio de microbiologia, da farmcia e da Comisso para Controle da Infeco Hospitalar do HUPE/UERJ foi realizado um estudo retrospectivo de infeces/colonizaes por cepas de S. aureus (fevereiro 2005 a Julho 2011). Foi realizado um estudo caso e controle, utilizando como casos os pacientes com infeces por cepas CA-MRSA. Na avaliao da susceptibilidade aos antimicrobianos usados em infeces graves por MRSA (vancomicina, teicoplanina, daptomicina e linezolida), foram determinadas as concentraes inibitrias mnimas (CIM) das amostras por diferentes metodologias (testes de difuso em agar, microdiluio em caldo e E-test). Nas analises das tendncias temporais da apresentao dos subtipos de MRSA, usando um critrio fenotpico para classificao das cepas MRSA, foi observada uma diminuio do nmero de cepas de MRSA multirresistente (HA-MRSA) (p<0.05). Tambm foi observada uma tendncia ao aumento de cepas no-multirresistentes (CA-MRSA), mas sem alcanar a significncia estatstica (p = 0.06) igual que os S. aureus sensveis a meticilina (MSSA) (p = 0.48). No houve associao entre o subtipo de MRSA e a mortalidade devida infeco por cepas MRSA. Uma idade acima de 70 anos (OR: 2.46, IC95%: 0.99 - 6.11), a presena de pneumonia adquirida no hospital (OR: 4.94, IC95%: 1.65 -14.8), a doena pulmonar obstrutiva crnica (OR: 6.09, IC95% 1.16 31.98) e a leucemia (OR: 8.2, IC95%: 1.25 54.7) foram fatores de risco associadas mortalidade nas infeces por cepas de S. aureus. Usando curvas de Kaplan-Meier, foi observada uma tendncia ao aumento da mortalidade em infeces causadas por MSSA na primeira semana, porm sem alcanar significncia estatstica (p = 0.07). No foram observadas amostras MRSA com susceptibilidade intermediaria a vancomicina, linezolida, daptomicina ou teicoplanina. A dinmica das infeces por S. aureus no HUPE/UERJ mudou durante o perodo de estudo, com menor nmero de episdios infecciosos causados por cepas de MRSA multirresistentes. Existe uma tendncia ao aumento das cepas no-multirresistentes de MRSA entanto que a taxa de infeces por MSSA permaneceu estvel no perodo do estudo. O perfil de resistncia dos estafilococos no teve associao com a mortalidade
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Este estudo avaliou a eficincia da oleuropena (OLE) (composto fenlico extrado das folhas de Oliveira) isolada e associada aos sanitizantes comerciais cido peractico 2% (APA), hipoclorito de sdio 2% (HS), perxido de hidrognio 3% (PH), digluconato de clorexidina 2% (DC), cloreto de benzalcnio 1% (CB) e iodofor 2% (IO), para inativao de clulas em suspenso e biofilmes monoespcie e multiespcie formados em superfcies de ao inoxidvel ou microplaca de poliestireno por Listeria monocytogenes (ATCC 7644), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Escherichia coli (ATCC 25922), todas classificadas como fortes produtores de biofilmes. Os isolados foram semeados em caldo TSB (caldo tripticase soja), incubados (37C/24h) e corrigidos a ~108clulas/mL (escala 0,5 McFarland). Para bactrias em suspenso, a resistncia a sanitizantes foi determinada pela Concentrao Inibitria Mnima (CIM) em tubos e pelo mtodo de Disco Difuso em gar (DDA), no qual as bactrias foram plaqueadas em gar TSA contendo discos de 6mm de papel filtro embebidos nos sanitizantes. Aps a incubao, a medio dos halos de inibio foi feita com paqumetro. Para os ensaios de resistncia dos biofilmes aos compostos sanitizantes, foram utilizadas microplacas de poliestireno 96 poos, as quais foram preparadas para incubao-fixao dos biofilmes e submetidas leitura em espectrofotmetro de ELISA (600 nm). Em seguida, as placas foram lavadas com soluo salina tamponada (PBS, pH 7.4) e os sanitizantes inseridos por 1 minuto. Aps neutralizao com tiossulfato de sdio (5 minutos), as placas foram lavadas com PBS e metanol, coradas com cristal violeta 1% e coradas com cido actico glacial (33%) para nova leitura a 570nm. A eficcia da remoo do biofilme pelos sanitizantes foi comparada pelo ndice de formao de biofilme (IFB). As imagens do ao inoxidvel aps tratamento com sanitizante foram feitas atravs de Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV) e Microscopia Confocal, para visualizar a persistncia dos biofilmes. Os valores de CIM (diluio 1:2) mostraram que OLE no teve atividade bactericida. No mtodo DDA, L. monocytogenes, foi resistente OLE, enquanto E. coli e S. aureus apresentaram resistncia intermediria. Os sanitizantes comerciais apresentaram boa atividade bactericida nos ensaios de CIM e DDA, sendo que as associaes de OLE aos sanitizantes comerciais aumentaram o efeito germicida. Nos ensaios com biofilmes em monoespcie, somente os sanitizantes comerciais, isolados ou associados com OLE, foram eficazes de reduzir o valor de BFI em microplaca de poliestireno. Em biofilmes multiespcie, OLE apresentou efeito antimicrobiano, sobretudo sobre a associao de L. monocytogenes + E. coli + S. aureus (reduo: 91,49%). Nenhum dos compostos avaliados foi capaz de inativar completamente os biofilmes nas superfcies de ao inoxidvel, uma vez que clulas viveis foram observadas aps os tratamentos com os sanitizantes, indicando persistncia dos biofilmes. Os resultados indicam que a oleuropena apresentou potencial para incrementar o efeito bactericida de sanitizantes comerciais para eliminao de biofilmes em superfcies inertes, sendo necessrios estudos para compreender os mecanismos de ao dessas combinaes.
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Realizou-se um trabalho experimental com o objectivo de obter informao sobre a evoluo do crescimento de Staphylococcus aureus. Foram utilizadas duas estirpes de Staphylococcus aureus, uma isolada a partir de rissis de frango e uma estirpe de referncia, a ATCC n. 9213, estas estirpes foram sujeitas a 3 valores de pH diferentes (que representam os valores de pH que possvel, ou seja pH 4, 5,5 e 7, a 3 valores de concentrao de NaCl, nomeadamente, 0,5%, 7% e 15%. A temperatura de desenvolvimento ser de 7C, 37C e 50aC. Utilizaram-se dois mtodos para avaliar o crescimento de Staphylococcus aureus, ao longo do tempo, nomeadamente o Mtodo Turbidmtrico e o Mtodo de contagem de unidades formadoras de colnias (mtodo das diluies sucessivas). ABSTRACT: Carried out experimental work in order to obtain information on the evolution of the growth of Staphylococcus aureus. We used two strains of Staphylococcus aureus, a strain isolated from a chicken patties and one reference strain, ATCC N 29213, these strains were subjected to 3 different pH values (which represent the values of pH it is possible, or is pH 4, 5.5 and 7, the 3 values of NaCI concentration, namely, 0.5%, 7% and 15%. The growth temperature is 7 C, 37C and 50C. We used two methods to evaluate the growth of Staphylococcus aureus, over time, including the turbidimetric method and the method of counting colony forming units (method of successive dilutions).
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Hand hygiene is critical in the healthcare setting and it is believed that methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), for example, is transmitted from patient to patient largely via the hands of health professionals. A study has been carried out at a large teaching hospital to estimate how often the gloves of a healthcare worker are contaminated with MRSA after contact with a colonized patient. The effectiveness of handwashing procedures to decontaminate the health professionals' hands was also investigated, together with how well different healthcare professional groups complied with handwashing procedures. The study showed that about 17% (925%) of contacts between a healthcare worker and a MRSA-colonized patient results in transmission of MRSA from a patient to the gloves of a healthcare worker. Different health professional groups have different rates of compliance with infection control procedures. Non-contact staff (cleaners, food services) had the shortest handwashing times. In this study, glove use compliance rates were 75% or above in all healthcare worker groups except doctors whose compliance was only 27%.
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A new method for estimating the time to colonization of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) patients is developed in this paper. The time to colonization of MRSA is modelled using a Bayesian smoothing approach for the hazard function. There are two prior models discussed in this paper: the first difference prior and the second difference prior. The second difference prior model gives smoother estimates of the hazard functions and, when applied to data from an intensive care unit (ICU), clearly shows increasing hazard up to day 13, then a decreasing hazard. The results clearly demonstrate that the hazard is not constant and provide a useful quantification of the effect of length of stay on the risk of MRSA colonization which provides useful insight.
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Healthcare-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA) infection may cause increased hospital stay or, sometimes, death. Quantifying this effect is complicated because it is a time-dependent exposure: infection may prolong hospital stay, while longer stays increase the risk of infection. We overcome these problems by using a multinomial longitudinal model for estimating the daily probability of death and discharge. We then extend the basic model to estimate how the effect of MRSA infection varies over time, and to quantify the number of excess ICU days due to infection. We find that infection decreases the relative risk of discharge (relative risk ratio = 0.68, 95% credible interval: 0.54, 0.82), but is only indirectly associated with increased mortality. An infection on the first day of admission resulted in a mean extra stay of 0.3 days (95% CI: 0.1, 0.5) for a patient with an APACHE II score of 10, and 1.2 days (95% CI: 0.5, 2.0) for a patient with an APACHE II score of 30. The decrease in the relative risk of discharge remained fairly constant with day of MRSA infection, but was slightly stronger closer to the start of infection. These results confirm the importance of MRSA infection in increasing ICU stay, but suggest that previous work may have systematically overestimated the effect size.
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The purpose of this paper is to determine the prevalence of the toxic shock toxin gene (tst) and to enumerate the circulating strains of methicillin-sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) and methicillin-resistant S. aureus (MRSA) in Australian isolates collected over two decades. The aim was to subtype these strains using the binary genes pvl, cna, sdrE, pUB110 and pT181. Isolates were assayed using real-time polymerase chain reaction (PCR) for mecA, nuc, 16 S rRNA, eight single-nucleotide polymorphisms (SNPs) and for five binary genes. Two realtime PCR assays were developed for tst. The 90 MRSA isolates belonged to CC239 (39 in 1989, 38 in 1996 and ten in 2003), CC1 (two in 2003) and CC22 (one in 2003). The majority of the 210 MSSA isolates belonged to CC1 (26), CC5 (24) and CC78 (23). Only 18 isolates were tst-positive and only 15 were pvl-positive. Nine MSSA isolates belonged to five binary types of ST93, including two pvlpositive types. The proportion of tst-positive and pvl-positive isolates was low and no significant increase was demonstrated. Dominant MSSA clonal complexes were similar to those seen elsewhere, with the exception of CC78. CC239 MRSA (AUS-2/3) was the predominant MRSA but decreased significantly in prevalence, while CC22 (EMRSA-15) and CC1 (WA-1) emerged. Genetically diverse ST93 MSSA predated the emergence of ST93- MRSA (the Queensland clone).
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The aim was to determine the evolutionary position of the Staphylococcus aureus clonal complex 75 (CC75) that is prevalent in tropical northern Australia. Sequencing of gap, rpoB, sodA, tuf, and hsp60 and the multilocus sequence typing loci revealed a clear separation between conventional S. aureus and CC75 and significant diversity within CC75.
